接收细胞并将其放行到常规工作

  1. 打开或解冻前核对标签、运输状态、文档和预期保存方式。
  2. 建立记录,把冻存管、来源文件、操作者、日期和隔离位置关联起来。
  3. 按照来源说明复苏,在首次恢复阶段避免同时加入多个未经计划的优化变量。
  4. 在身份与污染检查完成前保持隔离。
  5. 只有达到预先规定的质量条件后,才进入常规实验流程。

常规观察本身就是流程的一部分

换液或传代不应只因为日历提醒到了。操作者需要先检查培养状态,并记录支持这次操作的证据。

有价值的观察包括容器内分布、贴附、形态、培养基外观、碎屑、相对于上次观察的生长,以及同批制备容器之间的差异。

  • 在接种后相同时间点进行比较。
  • 先记录偏差,再尝试纠正。
  • 不要只写“正常”,应把判断连接到这批细胞自己的基线。

传代的目标是保持可比较性

传代不是把细胞从一个容器搬到另一个容器就结束,而是要获得起始条件明确、恢复情况能够与既往传代比较的新培养。

应记录传代前状态、消化方法、暴露或操作偏差、计数和活率方法、接种计算、最终体积和返回培养环境的时间。

在细胞变得不可替代之前建立工作库

当身份与污染状态可接受时,应按照细胞来源和机构流程建立有记录的细胞库。工作库能够减少无限连续传代带来的遗传和表型漂移,也为污染或操作事故提供已知恢复点。

冻存记录应把每支冻存管与母培养、传代信息、冻存液、降温方法、保存位置和放行检测结果关联起来。

边界提示:冻存配方和降温条件具有细胞类型特异性,应使用已验证流程,不要照搬通用配方。